Садржај

• Главна разлика
• Соутхерн Блоттинг вс. Вестерн блоттинг
• Упоредни графикон
• Шта је јужни блотинг?
• Шта је Вестерн Блоттинг?
• Кључне разлике
• Закључак

Главна разлика

Главна разлика између Соутхерн Блоттинг и Вестерн Блоттинг је та што је Соутхерн Блоттинг техника која се користи за откривање одређеног фрагмента ДНК у датом узорку док се Вестерн Блоттинг користи за проналажење одређеног протеина у датом узорку.

Соутхерн Блоттинг вс. Вестерн блоттинг

Пљескавица је техника коју научници користе за одвајање различитих врста молекула из смеше или узорка. У овој техници, макромолекуле попут нуклеинских киселина (ДНК и РНА) и протеина у мешавини се крећу кроз гел плочу. Овде ће се ситне честице кретати брже од крупнијих. Ови молекули су притиснути на површину имобилисане мембране која преноси молекуле на мембрану. Постоје различите врсте блотирања на основу детекције специфичног материјала, тј. Јутарња блокада, западња блокада и западња блотација. Соутхерн блоттинг је она врста замагљивања која се користи за откривање ДНК, док се Вестерн блоттинг користи за проналажење протеина. Јужно распршивање је развио Едвард М. Соутхерн током 1975. Дакле, познато је као Соутхерн блоттинг. С друге стране, западно баљење развила је група Георге Старка на Универзитету Станфорд 1979. То име је коришћено да се подудара са јужном блотингу. Јужно блотирање се користи за проналажење специфичне секвенце ДНК док се западња блотина користи за проналажење специфичне секвенције амино киселина или протеина.

Упоредни графикон

Соутхерн Блоттинг	Вестерн блоттинг
Техника која се користи за проналажење специфичне секвенце ДНК у датој смеши позната је и као јужњачки блот.	Техника која се користи да се утврди специфична секвенца аминокиселина протеина у датој смеши позната је као јужњача.
Развијен од стране
Јужно мрље развио је Едвард М. Соутхерн 1975. године.	Вестерн блотмент развила је група Георге Старка на Универзитету Станфорд 1979. године.
Врста детекције
Соутхерн блот се користи за проналажење специфичне секвенце ДНА.	Вестерн блот се користи за проналажење специфичне секвенце аминокиселина или протеина.
Принцип
Делује на принципу хибридизације.	Делује на принципу имунодетекције или интеракције антиген-антитело.
Сонда
Као сонда се користи једноланчана ДНК или понекад РНА.	Примарна и секундарна антитела се користе као сонда.
Гел електрофореза
Агарозна електрофореза гела користи се у јужном упијању.	СДС ПАГЕ / Полиакриламидни гел који се користи за одвајање протеина у Вестерн блоттингу
Поступак брисања
Јужно зачепање следи поступак преноса капилара.	Вестерн Блоттинг следи поступак електричног преноса.
Узорак
За време јужног мрљања, узорак је потребно денатурирати.	За време западног третмана, узорак треба да буде у матичном стању.
Блокирање
Ниједан корак попут блокирања није укључен у јужно уклањање блота.	За време западног зачепљења, неспецифична места антитела су блокирана на папиру са нитроцелулозом уз помоћ млечног праха или говеђег серумског албумина (БСА).
Методе обележавања
Уобичајене методе обележавања које се користе у јужном флету су употреба хромогених боја или радио-обележавање или флуоресцентно обележавање итд.	Методе обележавања које се користе у западном флету су употреба флуоресцентно обележених антитела или радио-обележавање, хромогене боје или стварање диаминобензидина итд.
Методе откривања
Откривање светлости, ауторадиограф и промене боје користе се као методе детекције у јужном мрљу.	Методе детекције код западног мрљања су промјене у боји и детекција светлости итд.
Апликација
Јужна блотина користи се за откривање ДНК, тестирање очинства, ДНК фингинг, за идентификацију жртава, за идентификацију криминалаца, проналажење заразних узрочника и идентификацију мутације или преуређења гена, итд.	Вестерн блотмент се користи за проналажење броја протеина у мешавини, за детекцију присуства ХИВ-а, вируса и бактерија, итд. У серуму, за откривање оштећених протеина и користи се као дефинитивна мера за херпес, хепатитис Б, лајм болест и Цреутзфелдт-Јацоб болест, итд.

Шта је јужни блотинг?

Јужно упијање је најстарија метода накупљања коју је дао Едвин Соутхерн, назвавши је јужно упијање. Користи се за проналажење одређеног низа ДНК у датом узорку или смеши. Кораци који укључују током јужног блотмана су електрофореза, пренос и детекција специфичних секвенци. Пре свега, ДНК је фрагментизован уз помоћ специфичног рестрикцијског ензима. Затим се жељени фрагменти ДНК раздвоје гел електрофорезом. Ови фрагменти се денатуришу уз помоћ алкалног раствора, нпр. НаОХ, итд. Да би се одвојила два ланца ДНК. Ти се једноланчани ДНК фрагменти затим преносе на мембрану процесом брисања. Ова ДНА везана мембраном се затим третира са обележеном сондом. Ова сонда ће се везати за свој комплементарни ланац на мембрани ДНК који се може визуелизовати ауторадиограмом итд.

Шта је Вестерн Блоттинг?

Методу западног мрља пронашла је група Георге Старка на Универзитету Станфорд која се користи да идентификује одређени низ аминокиселина у протеину. Такође је позната и као блотта протеина или имуни блот. Кораци током Вестерн блоттинга су електрофореза, пренос и детекција специфичних протеина. Пре свега, хомогенизовати смешу. Затим раздвојите молекул који вас занима уз помоћ електрофорезе. Пренесите ове молекуле на мембрану и идентификујте специфични протеин помоћу специфичне сонде.

Кључне разлике

1. Техника која се користи за проналажење специфичне секвенце ДНК у датој смеши позната је као јужњачки блотмент док је техника која се користи да се утврди специфична секвенца аминокиселина протеина у датој смеши позната и као јужни блот.
2. Јужно распршивање је 1975. године развио Едвард М. Соутхерн, па је познато и као јужно распршивање. С друге стране, западну мрљу је развила група Георге Старк на Универзитету Станфорд 1979. године.
3. Соутхерн блот се користи за проналажење специфичне секвенце ДНА. Супротно томе, западни блот се користи да се утврди специфична секвенца аминокиселина или протеина.
4. Соутхерн блотнинг делује на принципу хибридизације са супротне стране; Вестерн блот делује на принципу имунодетекције или интеракције антиген-антитело.
5. Једноланчана ДНК или понекад РНА користи се као сонда код јужног блотирања са друге стране, а у примарном и секундарном антителу се користе као сонда.
6. Електрофореза гела од агарозе користи се у јужном блотингу док се СДС ПАГЕ / полиакриламидни гел користи за одвајање протеина у западном блотингу.
7. С друге стране, јужња мрља следи поступак преноса капилара; Вестерн Блоттинг следи поступак електричног преноса.
8. За време јужног блотирања, узорак треба денатурирати, док за време западног блотирања, узорак треба да буде у матичном стању.
9. Ни један корак попут блокирања није укључен у јужно зачепљивање на наличју, за време западног блотирања неспецифична места антитела су блокирана на папиру нитроцелулозе уз помоћ млека у праху или говеђег серумског албумина (БСА).
10. Уобичајене методе обележавања које се користе у јужном блотингу су употреба хромогених боја или радио-обележавање или флуоресцентно обележавање итд., Док се методе обележавања код западног блотирања користе флуоресцентно обележено антитело или радио-обележавање, хромогене боје или стварање диаминобензидина итд.
11. Детекција светлости, ауторадиограф и промене боје користе се као методе детекције у јужном мрљу, док су методе детекције у западном мрљу промене у боји и детекција светлости итд.
12. Јужни блот се користи за откривање ДНК, тестирање очинства, ДНК фингинг, за идентификацију жртава, за идентификовање криминалаца, проналажење узрочника инфекције и идентификацију мутације или преуређења гена, итд. Супротно томе, западни блот се користи за проналажење броја протеина у мешавине, за откривање присуства ХИВ-а, вируса и бактерија итд. у серуму, за откривање оштећених протеина и користи се као дефинитивна мера за херпес, хепатитис Б, лајмску болест и Цреутзфелдт-Јацоб болест, итд.

Закључак

Горња дискусија резимира да је јужњавање блота најстарија техника брисања која се користи за проналажење специфичног сегмента ДНК у узорку, док је последњи блонт откривен потоњи и коришћен је за идентификацију специфичне секвенце аминокиселина или одређеног протеина.